简介：摘要目的探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9)，荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度，采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量，筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×105巨噬细胞和100 μg/ml β葡聚糖体外常规培养12、24 h后，分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组，采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×105巨噬细胞、1×105胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后，分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组，取下室的胰腺腺泡细胞，采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。结果siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强，浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后，巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06，β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强，且呈β葡聚糖剂量依赖性；而阴性细胞组、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。结论巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化，提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。

简介：摘要目的探讨氢醌（HQ）诱导的人淋巴母细胞（TK6）恶性转化细胞周期和凋亡情况及其相关的调控机制。方法于2014年3月，以20 μmol/L HQ染毒TK6细胞，每次染毒时间为24 h，每周1次，处理19周，设为实验组，同时以磷酸盐缓冲液（PBS）处理19周的TK6细胞为对照组；在调控机制的探讨中将细胞分为4组，即对照组、实验组、对照抑制剂组、实验抑制剂组（加入10 μmol/L P600125）。采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡的情况；Western成blot检测细胞周期相关蛋白和JNK信号通路蛋白的表达水平。结果与对照组比较，实验组G0/G1期细胞所占比例明显降低（P=0.001），S期细胞所占比例明显增加（P=0.002）；实验组细胞p-Rb（Ser780）、E2F1、Cyclin D1、p-p16（Ser152）、JNK1、p-JNK1（Thr183/Tyr185）、c-jun、p-c-jun（Ser63）蛋白表达均上调（P=0.015、0.021、0.001、0.001、0.005、0.001、0.039、0.003），而Rb、p16蛋白表达明显下调（P=0.048、0.002）；加入SP600125抑制JNK信号通路后，与实验组比较，实验抑制剂组细胞周期分布和细胞凋亡率均无明显变化，差异无统计学意义（P=0.946、0.923）；c-jun蛋白表达下调，Rb蛋白表达上调，差异有统计学意义（P=0.040、0.027）。结论HQ诱导的TK6细胞恶性转化过程中，细胞周期阻滞于S期，p16/pRb信号通路被抑制，而JNK信号通路被激活，但被激活的JNK信号通路可能不参与调控HQ诱导的TK6细胞恶性转化过程中的细胞周期改变进程。

简介：摘要目的观察靶向干扰Twist基因对肝细胞性肝癌Smad3以及上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达的影响，探讨Twist通过Smad3信号途径促进肝细胞癌中EMT的发生机制。方法收集山西医科大学第一医院普通外科2018年3月至2019年2月手术切除的肝细胞癌及癌旁组织各30例，免疫组织化学检测肝细胞癌及癌旁组织中Twist、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3蛋白的表达，分析其表达的相关性。实验分为3组：空白对照组(Control)、随机小干扰RNA(siRNA)组(Mock)及实验组(siRNA-Twist)。设计合成Twist小干扰RNA(siRNA)，脂质体2000法转染至HepG2细胞，蛋白质印迹法(Western blot)检测Twist、TGF-β1、Smad3、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达，Transwell实验观察细胞侵袭能力的变化。计数资料采用χ2检验，相关分析采用Spearman相关分析，多组计量资料的比较采用One-way ANOVA，两两比较采用LSD-t检验。结果Twist、TGF-β1、Smad3在肝癌组织中的表达率依次为70.0%、63.3%及33.3%，在癌旁组织中的表达率依次为6.7%、26.7%及73.3%，与癌旁组织比较，Twist及TGF-β1在肝细胞癌组织中表达增高，Smad3表达降低，差异均有统计学意义(Twist：χ2＝25.452，P<0.01；TGF-β1：χ2＝8.148，P<0.01；Smad3：χ2＝9.643，P<0.01)。Twist在肝细胞癌中的表达与TGF-β1呈正相关(r＝0.408，P<0.05)，与Smad3呈负相关(r＝－0.463，P<0.05)。靶向干扰Twist基因可上调HepG2细胞Smad3、E-cadherin蛋白的表达(Smad3：F＝25.625，P<0.01；E-cadherin：F＝86.858，P<0.01)，可下调TGF-β1、Vimentin蛋白的表达(TGF-β1：F＝28.271，P<0.01；Vimentin：F＝98.412，P<0.01)，差异有统计学意义。靶向干扰Twist基因可降低HepG2细胞增殖及侵袭能力。结论Twist通过Smad3信号途径促进肝细胞癌中EMT的发生。

简介：摘要慢性肾脏病作为全球最严重的健康问题之一，最终都会向肾间质纤维化方向进展，而上皮——间充质转化(EMT)可能在此过程中起重要作用。EMT过程涉及多种分子和信号通路的参与，其具体机制仍在被不断探索。本文聚焦于肾小管上皮细胞EMT在肾间质纤维化中的作用机制，对其中主要信号通路的最新研究进展进行总结。

简介：目的通过建立小鼠原位肝癌模型。检测荷瘤小鼠外周血髓系抑制性细胞（MDSC）的比例和血清转化生长因子（TGF）-β1水平，探讨其在肝癌发病中的作用机制。方法建立小鼠原位肝癌模型，分离荷瘤小鼠外周血的单个核细胞。流式细胞仪检测荷瘤小鼠不同时间外周血MDSC的比例；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测荷瘤小鼠血清TGF—β1水平。以同期正常小鼠作对照。结果荷瘤小鼠外周血MDSC比例明显升高：对照组、模型组7、14、21d外周血MDSC的比例分别为（3．5±2．2）％、（9．4±2．6）％、（16．4±5．6）％、（25．3±11．3）％，除模型组7d与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）外，其余各组与对照组比较均有统计学意义（P〈0．05）：荷瘤小鼠血清TGF—β1水平明显升高：对照组、模型组7、14、21d血清TGF—β1水平分别为（4．9±1．4）、（14．1±6．0）、（24．0±3．3）、（9．2±1．2）ng／ml。除模型组21d与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）外，其余各组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。外周血MDSC的比例与血清TGF-β1水平呈明显正相关（r=0．564，P〈0．05）。结论随着肿瘤的进展，外周血MDSC的比例明显升高，且与血清TGF—β1水平呈明显正相关，提示荷瘤小鼠外周血MDSC的比例与肿瘤的生长进展密切相关，MDSC通过分泌TGF—β1发挥免疫抑制作用，可促进肿瘤的生长与转移。

简介：摘要目的探讨基质硬度通过yes相关蛋白(YAP)促进脑胶质瘤细胞上皮间质转化(EMT)和血管生成拟态(VM)形成的机制。方法在不同基质硬度条件下培养人脑胶质瘤U87细胞株，0.2、16.0和64.0 kPa 3种硬度分别代表正常大脑、胶质瘤和极度僵硬。以CCK8实验检测胶质瘤细胞的增殖能力，采用免疫荧光染色检测YAP细胞定位的改变，以实时定量PCR检测YAP靶基因CTGF、CRY61的表达，以蛋白印迹实验检测YAP及细胞增殖信号Akt、ERK 1/2的磷酸化表达。通过免疫荧光染色和蛋白印迹实验检测EMT相关蛋白Vimentin、E-cadherin、Twist的表达。在软、硬基质3D培养下检测VM形成的情况。转染shYAP慢病毒后，检测YAP干扰对基质硬度作用于胶质瘤细胞的增殖、间质蛋白(Vimentin和Twist)表达和VM形成的影响。结果随着基质硬度的增高，胶质瘤细胞的增殖活性及其增殖信号通路Akt、ERK 1/2的磷酸化表达增加(均P<0.05)，胶质瘤细胞的YAP核转位增加，磷酸化YAP的表达逐渐下降(P<0.05)，而CTGF和CRY61基因的表达均升高(均P<0.05)。免疫荧光染色和蛋白印迹实验结果表明，随着基质硬度的增高，EMT元件Vimentin、Twist的表达增高，上皮标志E-cadherin的表达减低(均P<0.05)。与软基质3D培养下相比，硬基质培养条件下U87细胞VM管样结构的形成增多(P<0.05)。干扰YAP的表达可减低较高的基质硬度促进胶质瘤细胞增殖、Vimentin和Twist的表达以及VM形成的作用(均P<0.05)。结论基质硬度可通过YAP促进胶质瘤细胞的增殖、EMT以及VM形成，靶向调控基质硬度和YAP可能可以作为胶质瘤治疗的新策略。

简介：1．底面边长为2m，高为1m的正三棱锥的全面积为——m2．

简介：摘要学困生一般是指学习成绩或思想品德等非智力因素相对较差的学生。由于每个学生的家庭环境、社会环境、自身的心理素质和基础不同，每个学生存在着一定的差异。因此，每个学校，每个班级都会或多或少地存在着学困生。根据素质教育面向全体学生的要求，每一个学生都要有所进步、有所发展。因此，如何转化学困生是学校、班级面临的一项十分重要的问题。

简介：

简介：解题即转化,转化当然最讲究等价性,但经常见到类似这样的例子：例1当x≥1时，xlnx≥k（x-1）恒成立，求k的取值范围．

简介：竞赛是一种短兵相接的显型竞争。创造让差生成功的竞赛活动，成功就会成为他们转化的契机。无庸置疑，竞赛可以使参赛者加足马力，鼓足劲儿去争、去夺，可以加快速度、提高效率。但将竞赛法运用于差生的转化一定要巧妙灵活一些：争强好胜本来是青少年的天性，但由于差生也爱面子，如

简介：做好学困生的转化工作有助于优化班级学风、班风,易于教学、便于管理,可以提高班级整体教学成绩,可以挽救和改变一部分学生的命运。因而学困生的转化工作是家庭、学校、教师都普遍关注的问题,也是学校教育的一个难点，具有十分重要的意义。

简介：有些分数应用题,用一般方法解答比较麻烦。对于这类题我们可以先将题目中的关键条件进行转化,然后再寻找解题的巧妙方法。[题目]学校有120本练习本,分给六年级两个班。一班分到的本数的1/3与二班分到的本数的1/2相等。这两个班各分到了多少本练习本?[一般解法]由“一班分到的本数的1/3与二班分到的本数的1/2相等”可知,如果把二班分到的本数看作单位“1”,那么,一班分到的本数就

简介：王师傅加工1500个零件，由于改进了生产技术，工效提高到原来的2．5倍，比原来加工同样多的零件提前18小时完成任务。原来每小时加工多少个？

简介：

简介：摘要新课程目标向教师提出了基础教育下全面素质教育的实质性内容和具体要求。而教育的实施者——教师，在新课程的理念下，其角色地位也发生了根本性的转化。本文以新课程理念为指导，与传统教师的角色地位作为对比，阐述在基础教育下的教师角色应该是多元整合的教师角色。

简介：摘要实施九年制义务教以来，学生水平参差不齐，所以在教育教学工作中，颇令教师们感到头疼的，就是如何转化学困生。如何做好学困生的转化工作是实施素质教育和提高学生素质的前提和保证。因此，这项工作应是每位教育工作者的重任。笔者现就这方面的问题，谈一些个人的体会。

简介：

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简介：[摘要]任何事物的发展过程都是循序渐进的，学困生的转变不仅如此，还具有反复性。对于他们的转变，更多需要的是忍耐和等待。你不能指望着他们一下子就转变到你所期望的那种程度。对于他们要多忍耐,用赞赏的眼光看待学生时，就会发现学生有许多优点，而用挑剔的眼光看待学生，却只能看到他们的一大堆缺点！[关键词]学困生转化所谓的“学困生”是在教育教学中由于家庭、社会、学校等诸方面的因素使学生思想压力过大，自卑感强而导致学生心理负担过重，学习兴趣低，学业有困难的学生。任何事物的发展过程都是循序渐进的，学困生的转变不仅如此，还具有反复性。对于他们的转变，更多需要的是忍耐和等待。你不能指望着他们一下子就转变到你所期望的那种程度……