简介:应用酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母,用以检测类,抗雌激素化合物和环境样品的类,抗雌激素活性.采用多聚酶链反应(PCR)法扩增人雌激素受体(hER)基因,构建诱饵质粒pGBKT7-ERLBD;分别提取并纯化两种含有ER共激活因子基因的靶质粒pGADg24-GRIP1和pGAD424-SRC1;诱饵质粒和靶质粒同时转染酵母细胞Y187,于营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)上筛选阳性菌落,分别构建两种ER双杂交酵母ER+GRIP1和ER+SRC1.考察双杂交酵母与不同激素:17β-雌二醇(E2)、二氢睾酮(DHT)、孕酮(PG)以及三碘甲状腺原氨酸(T3)的结合情况,并考察了雌激素受体拮抗剂4-羟基他莫昔芬(4-OHT)与酵母的相互作用.结果表明:ER+GRIP1和ER+SRC1酵母均能够专一性的和E2结合,并存在显著的剂量-效应关系,E2对ER+GRIP1和ER+SRC1酵母β-半乳糖苷酶活性诱导的EC50值分别为7.3×10^-11mol·L^-1和1.5×10^-10mol·L^-1,其中ER+GRIP1酵母细胞诱导产生的酶活性值明显高于ER+SRC1-酵母细胞.4-OHT能够抑制E2诱导ER+GRIP1酵母细胞产生的酶活性,并存在显著的剂量-效应关系,IC50值为1.0×10^-7mol·L^-1.表明重组人雌激素受体基因酵母可以用于检测化合物和环境样品的类,抗雌激素活性.
简介:DAB啤酒酵母活力高、适应性强、发酵速度快、双乙酰还原迅速。现将我厂使用DAB酵母的情况介绍如下:一、DAB酵母的特点:(一)生长性状:细胞卵园型,在麦汁固体培养基上,菌落乳白色,不透明,有光泽,表面光滑湿润,生长凸起,边缘整齐。培养时间延长,菌落色泽逐渐变暗,斜面保藏时间长时,可变成褐色。在麦汁液体培养基中发酵,表面产生气泡和泡沫,菌体悬浮在培养基中呈混浊状,发酵后期菌体细胞沉积于器底,发酵液变清。(二)生产性状:1.凝聚性强。2.酵母死亡率低。我厂使用1—4代酵母泥,死亡率<1%。3.发酵度高。主发酵完毕真正发酵度可达68~69%,成品啤酒达69~70%,最高达72%。