简介:目的通过比较观察激素敏感的MCF-7细胞在体外干细胞培养和常规培养条件下雌激素受体(ER)变化及对内分泌治疗药物的敏感性变化,初步探讨肿瘤干细胞与内分泌耐药的关系。方法分别于常规培养及干细胞培养条件下(悬浮球培养)培养激素敏感的MCF-7细胞株,流式细胞仪检测分子表型CD44^+CD24^-/low与CD44+CD24+亚群细胞比例变化,免疫细胞化学法测定ERa和ERl3的表达变化,MTT法检测细胞对他莫西芬的敏感程度。分别以t检验、卡方检验、方差分析进行统计分析。结果干细胞培养条件下CD44^+CD24^-/low亚群细胞的比例为(1.60±0.08)%,比常规培养条件下的(0.27±0.08)%显著增加(t=-12.10,P=0.00),而CD44+CD24+亚群细胞比例由(5.59±0.88)%增至(30.63±4.40)%(t=-5.58,P=0.00)。干细胞培养条件培养下ERα和ERβ表达率较常规培养下调,分别由85.27%和90.53%降至69.43%和73.20%,差异有统计学意义(χ^2=214.64,P=0.00;χ^2=303.58,P=0.00),且对他莫西芬的敏感性降低,IC50值由(9.82±0.31)μmol/L升至(16.46±0.50)μmol/L,再次诱导分化后ER并未出现上调,对他莫西芬的敏感性仍旧降低(F=113.63,P=0.00)。结论与常规培养相比较,体外干细胞培养条件下可以培养出含高比例具有干细胞特性的CD44+CD24^-/low与CD44+CD24+亚群细胞的微球囊,其ER仍为阳性表达,但对他莫昔芬治疗敏感性减低,推测其可能是乳腺癌内分泌耐药的原因。
简介:摘要目的探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAchR)在迷走神经电刺激治疗缺血性脑卒中模型小鼠神经炎症损伤中的作用及机制。方法90只SPF级小鼠按照随机数字表法分为假手术+迷走神经电刺激组(sham+VNS组)、模型组(永久性大脑中动脉闭塞组pMCAO组)、模型+迷走神经电刺激组(pMCAO+VNS组)、模型+α7nAchR激动剂组(pMCAO+P组)、模型+迷走神经电刺激+α7nAchR拮抗剂(pMCAO+VNS+A组)、模型+迷走神经电刺激+α7nAchR拮抗剂安慰剂组(pMCAO+VNS+AC组)。造模时监测各组小鼠生命体征变化,并于造模成功后7 d、14 d和21 d通过神经系统严重程度评分(neurologic severity score,NSS)和胶布撕脱实验进行神经功能缺损评估;采用免疫荧光法和Western blot法检测小鼠脑组织α7nAchR的表达及其神经细胞定位,ELISA法检测炎性因子TNF-α和IL-6含量。采用Prism 8.0软件进行统计分析,采用单因素方差分析对造模期间生理参数进行统计,使用重复测量方差分析比较神经行为学评分结果,t检验比较蛋白质水平以及荧光强度。结果(1)重复测量方差分析结果显示,NSS评分中组别与时间的交互作用不显著(F=0.91,P>0.05),各组小鼠的组别主效应(F=46.68,P<0.05)与时间主效应(F=25.56,P<0.05)均显著。Tukey's检验结果显示,在第21天的NSS评分中,pMCAO+VNS组和pMCAO+P组小鼠的NSS评分均明显低于pMCAO组(P<0.05);pMCAO+P组与pMCAO+VNS组比较则差异无统计学意义(P>0.05);pMCAO+VNS+A组小鼠的NSS评分均高于pMCAO+VNS组(P<0.05),同时又明显低于pMCAO+VNS+AC组(P<0.05)。胶布撕脱实验中,小鼠的胶布接触时间和撕脱时间中组别与时间的交互作用不显著(F=0.67,0.71,均P>0.05),各组小鼠的组别主效应(F=30.12,42.46,均P<0.05)与时间主效应(F=52.18,47.34,均P<0.05)均显著。Tukey's检验结果显示,在第21天的胶布撕脱实验中,pMCAO+VNS组小鼠的胶布接触时间和撕脱时间均明显短于pMCAO组(均P<0.05);pMCAO+P组与pMCAO+VNS组比较则差异没有统计学意义(均P>0.05)。(2)免疫印迹实验表明,与pMCAO组(0.36±0.01)相比,pMCAO+VNS组和pMCAO+P组α7nAchR表达均增加[(0.83±0.03)、(0.67±0.02),t=13.53,16.08,均P<0.01],pMCAO+VNS+A组(0.37±0.01)较pMCAO+VNS组较显著降低(t=12.88,P<0.01)。免疫荧光结果也显示,与pMCAO组(3.75±0.19)相比,pMCAO+VNS组和pMCAO+P组小鼠脑组织α7nAchR蛋白表达均增加[(8.96±0.48)、(8.17±0.64),t=10.04,6.67,均P<0.05]。(3)ELISA结果表明,与pMCAO组比较,pMCAO+VNS组及pMCAO+P组小鼠血清和组织上清液中TNF-α水平和IL-6水平均明显降低于pMCAO组(t=23.28,15.30,12.26,11.08,均P<0.05)。pMCAO+VNS+A组小鼠血清和组织上清液中TNF-α水平以及血清和组织上清液中IL-6水平均高于pMCAO+VNS组(t=12.70,11.01,11.69,17.37;均P<0.05)和pMCAO+VNS+AC组(t=12.29,11.07,14.61,29.27;均P<0.05)。结论VNS能够减少pMACO小鼠脑组织炎症反应,改善神经运动评分,这一保护作用可能与VNS诱导的α7nAchR在缺血性脑卒中缺血半影区神经细胞中表达有关。
简介:摘要目的评价大鼠炎性痛形成时脊髓神经元P2X7受体与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/IL-1β信号通路的关系。方法SPF级健康成年雄性Wistar大鼠,体重180~220 g,取鞘内置管成功的大鼠40只,采用随机数字表法分为5组(n=8):对照组(CON组)、炎性痛组(IP组)、炎性痛+二甲基亚砜组(IP-DMSO组)、炎性痛+P2X7受体拮抗剂A740003组(IP-A组)和炎性痛+P2X7受体激动剂ATP组(IP-ATP组)。采用右后足踝关节腔内注射完全弗氏佐剂50 μl的方法制备炎性痛模型,CON组于右后足踝关节腔内注射等容量生理盐水。于造模前1 d、造模后即刻、1、2和3 d时,IP-DMSO组鞘内注射1%二甲基亚砜10 μl,IP-A组鞘内注射A740003 0.1 nmol(溶于10 μl二甲基亚砜中),IP-ATP组鞘内注射ATP 150 nmol(溶于10 μl二甲基亚砜中)。于造模后3 d时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。采用ELISA法检测右后足踝关节组织前列腺素E2(PGE2)含量和脑脊液IL-1β浓度。然后处死大鼠,取L4-6脊髓组织,采用Western blot法检测NLRP3、casepase-1和IL-1β的表达,采用免疫荧光法检测P2X7与神经元特异性核蛋白(NeuN)、NLRP3与NeuN的共表达情况。结果与CON组比较,IP组关节组织PGE2含量升高,其余4组MWT降低,TWL缩短,脑脊液IL-1β浓度升高,脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05);与IP组比较,IP-A组MWT升高,TWL延长,脑脊液IL-1β浓度降低,脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达下调,IP-ATP组MWT降低,TWL缩短,脑脊液IL-1β浓度升高,脊髓NLRP3、caspase-1和IL-1β表达上调(P<0.05),IP-DMSO组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。脊髓P2X7与NeuN存在共表达,NLRP3与NeuN存在共表达。结论脊髓神经元P2X7受体可通过激活NLRP3/IL-1β信号通路,参与了大鼠炎性痛的形成。
简介: 心理学研究表明,健康的心理对孩子成才和高尚人格的塑造至关重要.家长不应该只关心孩子生理方面的需要,更应该重视孩子健康心理的培养和性格、意志的磨炼,要有意识地与孩子进行情感交流,关心孩子的心理需要.……
简介: 心理学研究表明,健康的心理对孩子成才和高尚人格的塑造至关重要.家长不应该只关心孩子生理方面的需要,更应该重视孩子健康心理的培养和性格、意志的磨炼,要有意识地与孩子进行情感交流,关心孩子的心理需要.……
简介:1.指出下面文句中运用的修辞手法,分别说明其作用。风,咆哮吧!雷,闪耀吧!电,把一切沉睡在这黑暗怀里的东西,毁灭,毁灭呀!2.下列句中比喻运用不当的是A.他提着两个包,气喘吁吁地走着,像踩在棉花上似的深一脚浅一脚。B.战士在崎岖的小路上向前猛冲,脚步像踩在棉花上一般轻快。C.一群仙女踩在棉花似的云朵上,随着隐隐的仙乐,冉冉地向远方飘去。D.她突然瞥见路中央盘着一条昂头吐舌的大蛇,顿时感到两脚像踩在棉花上似的。3.阅读文段,指出划线句运用了哪些修辞手法,有什么表达作用。上野的樱花烂漫的时节,望去确也像绯红的轻云,但花下也缺不了成群结对的“清国留学生”的速成班,头顶上盘着大辫子,顶得学生制帽的顶上高高耸起,形成一座富士山。答:_____________________________________4.下面句子中运用了什么修辞手法?说明它运用得是否正确。碧野的《天山景物记》词汇丰富、绚丽多彩,就像夜空里的满天繁星一样。答:_____________________________________5.找出和“地中海沿岸被称为西方文明的摇篮”修辞手法相同的一项A.溪流在草原上徜徉,映着夕阳在野花丛中时隐时现……B.长...