简介:摘要目的通过建立小胶质细胞-神经元共培养系统,制备体外神经细胞炎症模型。方法选用小鼠BV-2小胶质细胞、NSC34运动神经元、HT-22海马神经元。实验Ⅰ 采用不同浓度LPS(10、100、500和1 000 ng/ml)刺激BV-2小胶质细胞,提取小胶质细胞培养上清液即条件培养基,分别培养两种神经元,采用CCK-8法选取导致神经元活力明显下降50%的LPS浓度用于Transwell共培养系统的建立。实验Ⅱ 将小胶质细胞接种于Transwell上室,神经元种于下室。采用随机数字表法分为2组(n=12):对照组和LPS组,小胶质细胞分别用细胞培养基、LPS培养或孵育6 h,随后更换新鲜培养基继续培养12 h,合并上、下室细胞继续培养。BV-2-NSC34 Transwell共培养系统共培养12 h,BV-2-HT-22 Transwell共培养系统共培养24 h。采用ELISA法检测神经元培养液IL-1β、IL-18浓度,采用流式细胞术检测神经元凋亡率,采用qRT-PCR检测神经元Bcl-2、Bax的mRNA表达,采用Western blot法检测神经元cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax的表达。结果实验Ⅰ BV-2-NSC34 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为10 ng/ml,BV-2-HT-22 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为1 000 ng/ml。实验Ⅱ 与对照组比较,LPS组神经元培养液IL-1β和IL-18浓度、神经元凋亡率升高,Bax及其mRNA表达上调,Bcl-2及其mRNA表达下调,cleaved caspase-3表达上调(P<0.05或0.01)。结论通过条件培养基技术与Transwell共培养技术成功建立小胶质细胞-神经元共培养系统,为术后认知功能障碍相关神经细胞炎症模型的建立提供实验方案。
简介:摘要:教育是一项系统工程,包含了家庭教育、学校教育、社会教育几种主要的教育形式。家庭以及存在于家庭中的子女与家长之间的相互关系,是智育、德育、美育和体育发展的第一所学校。因此,良好的家庭教育是一个人成长、成才的前提条件。学校教育是每个人成长的助催剂,《礼记》载:“师也者,教之以事而喻诸德也。”家校的紧密合作,通过班主任工作、家委会建构、家长学校开展等途径对学生培养工作起着积极的促进作用。鉴于以上的认识,注重家长学校的开办,加强管理网络建设,不断改革与创新家校合作机制,是完善学校教育功能,提升未成年人培养工作质量的关键。本文旨在通过对家校合作的必要性、家校合作关系中的角色定位以及家校合作的实施策略几个维度的探讨,力求为学校教育和班级管理工作寻找一种可行的办法和思路,为推动和谐校园建设和基础教育工作的发展助力。